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一種液體組培繁殖魔芋的方法.pdf

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一種 液體 繁殖 魔芋 方法
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摘要
申請專利號:

CN01131201.7

申請日:

2001.08.31

公開號:

CN1332956A

公開日:

2002.01.30

當前法律狀態:

終止

有效性:

無權

法律詳情: 專利權的終止(未繳年費專利權終止)授權公告日:2004.5.19|||授權|||公開|||實質審查的生效申請日:2001.8.31
IPC分類號: A01H4/00 主分類號: A01H4/00
申請人: 中國科學院石家莊農業現代化研究所;
發明人: 王玉珍; 羅景蘭
地址: 050021河北省石家莊市槐中路286號
優先權:
專利代理機構: 河北省科技專利事務所 代理人: 王琪
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法律狀態
申請(專利)號:

CN01131201.7

授權公告號:

|||1149919||||||

法律狀態公告日:

2007.11.07|||2004.05.19|||2002.01.30|||2001.12.12

法律狀態類型:

專利權的終止(未繳年費專利權終止)|||授權|||公開|||實質審查的生效

摘要

本發明提供一種液體組培繁殖魔芋的方法,抑制魔芋種塊在組培過程中的褐變現象,以提高增值速度和增值芽的數量和品質。這種液體組培繁殖魔芋的方法包括:1)、種芋消毒;2)、液體培養;3)、叢生芽的增殖幾個步驟;所述的液體培養基組份比例包括(mg/L):氯化鈣0-440、硫酸鎂0-370、磷酸二氫鉀170-200、硼酸0-10.5、硫酸鋅0-8.6、硫酸錳0-2230、硫酸亞鐵0-30.5、乙二銨四乙酸二鈉0-37.5、VB10.5-2、VB60.5-2,煙酸0.5-2.

權利要求書

1: 1、一種液體組培繁殖魔芋的方法包括: 1)、種芋消毒:將1-2年的魔芋塊莖洗凈,在無菌條件下切成小塊, 用酒精、氯化汞液、頭孢唑林鈉溶液其中一種或幾種浸泡消毒; 2)、液體培養:將魔芋小塊置于含有:磷、鉀、維生素、生長激素、 食糖其中一種或幾種有效成分的液體培養基內,經暗培養5-10天, 光照培養5-10天,形成形成愈傷組織; 3)、叢生芽的增殖:將帶有突起的愈傷組織按1∶3-1∶4的比例切 割,接種于包括K、P、Ca、Mg、B、Zn、Mn、Fe鹽其中一種或幾種, 生長激素卞基嘌呤(6-BA)、荼乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)其中一 種或幾種、維生素V B1 、V B6 、煙酸、肌醇其中一種或幾種的液體培養 基中,光照培養7-10天形成芽點。 2、根據權利要求1所述的液體組培繁殖魔芋的方法,其特征在于所 述液體培養基的組份包括(mg/L):氯化鈣0-440、硫酸鎂0-370、 磷酸二氫鉀170-200、硼酸0-10.5、硫酸鋅0-8.6、硫酸錳0-2230、 硫酸亞鐵0-30.5、乙二銨四乙酸二鈉0-37、V B1 0.5-2、V B6 0.5-2,煙 酸0.5-2.0、卞基嘌呤(6-BA)0.5-2.0、荼乙酸(NAA)0-0.5、吲 哚丁酸(IBA)0-0.5、水解乳蛋白0-200、蔗糖10000-30000、水余 量。 3、根據權利要求1或2所述的液體組培繁殖魔芋的方法,其特征在 于所述液體培養基的組份包括(mg/L)氯化鈣440、硫酸鎂370、磷 酸二氫鉀190、硼酸10.5、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、 乙二銨四乙酸二鈉27、V B1
2: 5、V B6 1.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA) 1.5、蔗糖30000、水余量。 4、根據權利要求1或2或3所述的工廠化快速繁殖魔芋的方法,其 特征在于所述液體培養基的組份還包括:氯化鈣440、硫酸鎂370、 磷酸二氫鉀190、硼酸10、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、 乙二銨四乙酸二鈉27、V B1 1.5、V B6 1.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA) 2.0、荼乙酸(NAA)0.5、水解乳蛋白200、蔗糖30000、水余量。 5、根據權利要求1或2或3或4所述的工廠化快速繁殖魔芋的方法, 其特征還包括:本方法適用于快速繁殖馬鈴薯、紅薯、山藥或其它 塊莖類植物。
3: 0、卞基嘌呤(6-BA)0.5-2.0、荼乙酸(NAA)0-0.5、吲 哚丁酸(IBA)0-0.5、水解乳蛋白0-200、蔗糖10000-30000、水余 量。 3、根據權利要求1或2所述的液體組培繁殖魔芋的方法,其特征在 于所述液體培養基的組份包括(mg/L)氯化鈣440、硫酸鎂370、磷 酸二氫鉀190、硼酸10.5、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、 乙二銨四乙酸二鈉27、V B1 1.5、V B6 1.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA) 1.5、蔗糖30000、水余量。 4、根據權利要求1或2或3所述的工廠化快速繁殖魔芋的方法,其 特征在于所述液體培養基的組份還包括:氯化鈣440、硫酸鎂370、 磷酸二氫鉀190、硼酸10、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、 乙二銨四乙酸二鈉27、V B1 1.5、V B6 1.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA) 2.0、荼乙酸(NAA)0.5、水解乳蛋白200、蔗糖30000、水余量。 5、根據權利要求1或2或3或4所述的工廠化快速繁殖魔芋的方法, 其特征還包括:本方法適用于快速繁殖馬鈴薯、紅薯、山藥或其它 塊莖類植物。

說明書


一種液體組培繁殖魔芋的方法

    【技術領域】

    本發明涉及到一種液體組培繁殖魔芋的方法,屬于植物的栽培方法技術領域,尤其適用于魔芋育苗繁殖。

    背景技術

    魔芋球莖含有較高的有機葡甘聚糖,是一種可溶性半纖維,具有凝膠,成膠等性能和顯著的減肥、降脂、降血糖的功效,可用于食品工業、化學工業、醫藥工業、農業、環保等多個領域,隨著魔芋產品的價值被市場越來越重視,目前魔芋種植已經在長江流或大面積展開,但是由于魔芋的自然繁殖系數低,多年來采用傳統的留種繁殖法,致使病毒積累,品種退化,優良種源缺少,難以形成產業規模。近年來有人開始探討利用植物組織培養技術繁殖魔芋,即采取優良植物體上的任何組織,通過人工配制不同營養成分和激素控制,使這一組織形成成千上萬個植株并且保存了母體全部優良性狀,這種方法可以在短時間內獲得大量組培苗,節約大量種用魔芋,同時可脫毒病毒保持品種的優良性狀,減少遺傳病,緩解優質種源的不足。但是由于魔芋組織含酚類物質比較多,使用傳統瓊脂類培養基和組培方法易產生褐化,嚴重影響培養增值芽的速度和質量。

    【發明內容】

    本發明的目的在于提供一種液體組培繁殖魔芋的方法,抑制魔芋種塊在組培過程中的褐變現象,以提高增值速度和增值芽的數量和品質。

    本發明的技術方案是這樣實現的:這種液體組培繁殖魔芋的方法包括:

    1)、種芋消毒:將1-2年的魔芋塊莖洗凈,在無菌條件下切成小塊,用酒精、氯化汞液、頭孢唑林鈉溶液其中一種或幾種浸泡消毒;

    2)、液體培養:將魔芋小塊置于含有:磷、鉀、維生素、生長激素、食糖其中一種或幾種有效成分地液體培養基內,經暗培養5-10天,光照培養5-10天,形成形成愈傷組織;

    3)、叢生芽的增殖:將帶有突起的愈傷組織按1∶3-1∶4的比例切割,接種于包括K、P、Ca、Mg、B、Zn、Mn、Fe鹽其中一種或幾種,生長激素卞基嘌呤(6-BA)、荼乙酸(NAA)、吲哚丁酸(IBA)其中一種或幾種、維生素VB1、VB6、煙酸、肌醇其中一種或幾種的液體培養基中,光照培養7-10天形成芽點;

    所述的液體組培繁殖魔芋的方法中所述液體培養基的組份比例包括(mg/L):氯化鈣0-440、硫酸鎂0-370、磷酸二氫鉀170-200、硼酸0-10.5、硫酸鋅0-8.6、硫酸錳0-2230、硫酸亞鐵0-30.5、乙二銨四乙酸二鈉0-37、VB10.5-2、VB60.5-2,煙酸0.5-2.0、卞基嘌呤(6-BA)0.5-2.0、荼乙酸(NAA)0-0.5、吲哚丁酸(IBA)0-0.5、水解乳蛋白0-200、蔗糖10000-30000、水余量。

    所述的液體組培繁殖魔芋的方法中所述液體培養基的組份較好比例包括(mg/L)氯化鈣440、硫酸鎂370、磷酸二氫鉀190、硼酸10、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、乙二銨四乙酸二鈉27、VB11.5、VB61.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA)2.0、荼乙酸(NAA)0.5蔗糖30000、水余量。

    所述的工廠化快速繁殖魔芋的方法中用于分化液體培養基的較好比例還包括:氯化鈣440、硫酸鎂370、磷酸二氫鉀190、硼酸10、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、乙二銨四乙酸二鈉27、VB11.5、VB61.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA)1.5、荼乙酸(NAA)0.2、水解乳蛋白200、蔗糖30000、水余量。

    所述的工廠化快速繁殖魔芋的方法也適用于快速繁殖馬鈴薯、紅薯、山藥或其它塊莖類植物。

    本發明采用的技術方案,對防治褐化、愈傷、快速誘導叢生芽的分化起到重要作用。其優點表現為:初培養中(愈傷組織的培養),誘導率從70%提高到100%,叢生芽的誘導率從70%提高到90%以上。叢生芽的誘導周期由原來的40天以上,縮短到20-30天,叢生芽生長狀態很好。

    具體實施方式實施例1、叢生芽分化培養

    1)、取材,在芽萌發之前取1-2年魔芋地下塊莖,洗凈后吸干多余水份。

    2)、材料消毒方法:在無菌條件下,將吸水后的魔芋塊莖切成5cm左右的塊,在75%的酒精中浸泡20-30秒,然后放入0.1%汞液中消毒10-15分鐘,無菌水沖洗4次,分割成0.3-0.5cm的小方塊,置于1%的頭孢唑林鈉抗菌素溶液中消毒3分鐘備用。

    3)、愈傷組織培養:在無菌條件下,將滅菌的培養物接種到液體培養基內,培養基的組分是(mg/L):氯化鈣200、硫酸鎂250、磷酸二氫鉀170、硼酸6.0、硫酸鋅3.5、硫酸錳10、硫酸亞鐵27.8、乙二銨四乙酸二鈉20、VB10.5、VB60.5,煙酸0.5、卞基嘌呤(6-BA)1.0、蔗糖20000、水余量。接種后暗培養一周,然后進行光照培養,培養20天左右,愈傷組織直徑達1-2cm。

    4)、分化培養:將愈傷組織按1∶3-1∶4的分化數切割,接種到液體培養基,培養基的組分是(mg/L):氯化鈣440、硫酸鎂370、磷酸二氫鉀190、硼酸10、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、乙二銨四乙酸二鈉27、VB11.5、VB61.5,煙酸1.5、卞基嘌呤(6-BA)1.0、蔗糖30000、水余量。5天后觀察到愈傷組織上出現明顯的芽點,15左右叢生芽苗長1cm,20-25天,叢生芽苗高1-3cm,有效芽苗達80%。此培養的光照強度為1500LX,光照時間12小時。實施例2、分化增殖培養1)、2)、3)、步驟與實施例1相同;4)、分化增殖:將愈傷組織,按1∶3-1∶4分化數切割,然后接種到液體培養基上,培養基的組分是(mg/L):氯化鈣440、硫酸鎂370、磷酸二氫鉀190、硼酸10.5、硫酸鋅8.6、硫酸錳2230、硫酸亞鐵30.5、乙二銨四乙酸二鈉27、VB11.5、VB61.5,煙酸1.5、水解乳蛋白200、卞基嘌呤(6-BA)2.0、荼乙酸(NAA)0.5蔗糖30000、水余量。5天左右觀察到愈傷組織變色,7天左右形成大量芽點,20-25天芽點增殖系數達6-10個,分化增殖率達90%。在芽分化培養過程中,塊莖表面不斷產生叢生芽,芽的分化能力很強,一個芽按年繁殖8代計算,一年可繁殖有效芽苗130多萬株。此培養所需溫度22-28℃,光照強度1500LX,光照時間12小時。

    在實施例1或2中取魔芋塊莖作培養材料,愈傷組織培養階段加入的液體培養基一般不要超過魔芋塊的1/3,保持濕度使之維持正常生長20天左右。增殖分化階段加入液體培養基可適當多一些,使之能維持正常生長25天左右。

    本發明提供的魔芋液體組培方法亦可用于培養其它塊莖植物,如馬鈴薯、紅薯、山藥等。

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